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南方菜豆花叶病毒等主要检疫性病毒、细菌胶体金层析技术研究
发布时间:2010-1-20 8:49:53 阅读:1114 次 新闻来源: 作者:
成果编号 CG2009000193
关键词
成果简介 课题来源:国家质检总局科技计划项目“主要检疫性病毒、细菌胶体金层析技术研究 ”,编号2006IK216。
本课题以我国5种进出境检疫性有害生物:烟草环斑病毒、南方菜豆花叶病毒、番茄环斑病毒、菜豆荚斑驳病毒以及西瓜果斑病菌为研究对象。研制出快速、准确的胶体金免疫层析检测试剂和相关的程序。
1本研究建立的GICA快速诊断试纸条,可对新鲜病叶和病种子等材料进行检测,操作十分简便,只需一步,在10~15min内即可获得诊断结果,具有很强的实用性和实时性,该快速检测方法对实验室的设备和人员技术要求较低,特别适合基层单位的实验室和田间快速诊断,易于普及;针对自然状况下病毒存在的复合感染,复合型胶体金免疫层析试纸条,在一张试纸条上同时检测出2种病毒或更多的病原,则可进一步降低检测的费用,提高检测效率。
2用GICA和GICA-RT-PCR两种方法分别对提纯病毒、病叶和病大豆种子或种皮进行检测,结果表明,用GICA-RT-PCR检测提纯病毒比GICA灵敏度提高50倍;检测大豆病叶提高10~100倍;检测病大豆种子或种皮可提高100倍。用GICA-RT-PCR可以直接扩增出目标片段,缘于GICA对病毒的特异性免疫捕获作用,富集了目标病毒,并能提供高质量的RNA模板,从而使RT-PCR对目标核酸进一步放大,提高了检测的灵敏度。可用于对检疫性有害生物的复核鉴定。
完成日期 2009-11-16
完成单位 中国检验检疫科学研究院
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